动物基因组DNA快速提取试剂盒

产品货号：

GS0058

中文名称：

动物基因组DNA快速提取试剂盒

英文名称：

Rapid Animal gDNA Isolation Kit

产品规格：

50次|100次

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本制品是百奥莱博最新研制成功的一种动物基因组DNA快速抽提试剂盒。无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂。从25mg动物组织可以获得10～20μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。抽提出的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。

组分	50次	100次
Buffer Digestion	24mL	48mL
Buffer PA	12mL	24mL
TE Buffer (pH8.0)	10mL	20mL

保存：室温，4℃保存时间更长。

注意事项

Buffer Digestion中含有刺激性化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

试剂准备

自备材料：水浴锅、小型高速离心机（最大离心力≥ 12000×g）、1.5mL离心管、75%乙醇、异丙醇、RNase A溶液
等。
Buffer Digestion在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于65℃溶解后使用。
提前将水浴锅调至65℃备用。

取25～50mg动物组织用液氮研磨成粉末，加到1.5mL离心管中，加入400μL Buffer Digestion，震荡混匀。65℃水浴1h至细胞完全裂解。
- 通常动物组织完全裂解需要1～3小时，取样过多会影响提取DNA的质量（动物脾脏取样量应≤10mg）。
- 水浴过程中，每10min颠倒混匀一次，可促进样品裂解。混合液变澄清透明为裂解完全。如溶液未变澄清，说明细胞裂解不彻底，应适当延长水浴时间，否则将可能降低DNA的得率或导致提取的DNA不纯。
- 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
加入200μL Buffer PA，充分颠倒混匀，置于-20℃冰箱放置5min。
室温10000rpm离心5min，将上清液(500～550μL)转移到新的1.5mL离心管中。
- 若上清液混浊，可再加入等体积氯仿混匀，12000rpm离心取上清。
加入等体积的异丙醇，颠倒5～8次使之充分混匀，室温放置2～3min。室温10000rpm离心5min，弃上清。
加入1mL 75%乙醇，颠倒漂洗1～3min，10000rpm离心2min，弃上清。
- 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
重复步骤5一次。
开盖室温倒置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略，否则残留的乙醇会严重影响后续实验。
- 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
- 过度干燥将导致DNA重新溶解困难，肉眼可见DNA沉淀变成半透明状，离心管无明显乙醇味道即可，避免使用真空干燥器进行干燥。
得到的DNA用50～100μL TE Buffer溶解。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。
- TE Buffer为10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH8.0。

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